作者:
赵跃斌周永安李玮史雅静张晶晶冯希云任艳杰苏红
单位:
山西省太原市中心医院 山西太原 030009
摘要:
以非哺乳动物类苯丙氨酸解氨酶替代非饮食疗法治疗苯丙酮尿症具有良好的前景。本文利用化学合成法合成了胡萝卜中苯丙氨酸解氨酶的全长基因,并克隆到pFastBacI 载体上,构建表达质粒。将质粒转化大肠杆菌DH10Bac菌株,将产生的重组Bacmid转化昆虫细胞,制备重组杆状病毒。 扩增杆状病毒,感染昆虫细胞,表达重组苯丙氨酸解氨酶蛋白。运用亲和层析、分子筛层析,成功纯化得到重组苯丙氨酸解氨酶蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,纯化的目的蛋白大小为78KD,与理论值一致,可应用于苯丙酮尿症的治疗研究。...
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